AISLAMIENTO, IDENTIFICACIÓN Y CARACTERIZACIÓN MOLECULAR DE BACTERIAS SIMBIÓTICAS FIJADORAS DE NITRÓGENO EN MEDICAGO SATIVA

ISOLATION, IDENTIFICATION AND MOLECULAR CHARACTERIZATION OF SYNTOTIC BACTERIA FIXING NITROGEN IN MEDICAGO SATIVA

Y. Bustamante Mamani¹, N. Colque Apaza¹, L. Hilary Cahuana¹, Sh. Huancahuire Mamani¹, k. Quenaya Escobar¹, M. Sumire Pari¹, C. Vasquez Choque¹, Julio Cesar Bernabé Ortíz¹

1. Escuela Profesional de Biología,

Universidad Nacional de San Agustín, Arequipa - Perú

Resumen: En el presente trabajo se aisló, identificó y caracterizó molecularmente a bacterias simbióticas fijadoras de nitrógeno asociada a nódulos de Medicago sativa en el distrito de Socabaya, Arequipa. Para lo cual se extrajo nódulos de la raíz de Medicago sativa, a partir de esta muestra se sembró en medio agar nutritivo, se incubó por 3 días. Luego del crecimiento de colonias, se seleccionaron cepas de bacterias, en las cuales se realizó el aislamiento y 3 repiques por el método de estrías para una mejor purificación de la cepa.

A la cepa bacteriana se le denominó “socabaya01” al cual se le realizó un antibiograma con 5 tipos de antibióticos (Erytromicina, Amikacina, Norfloxacina, Ceftriaxona y amikacina), así mismo se realizó pruebas de tinción de Gram. Finalmente, todas estas cepas se mandaron a secuenciar al Instituto de Biotecnología del ADN Uchumayo. Una vez obtenida la secuencia de ADN se realizó el árbol filogenético de la cepa bacteriana “socabaya01” en el programa BLAST, el cual presentó un 99.79% de similitud con Bacillus toyonensis. Además de ser el primer registro como bacteria endófita al encontrase en los nódulos de Medicago sativa.

PALABRAS CLAVE: Nódulos, Medicago sativa, “SOCABAYA 01”, BLAST, Antibiograma, Tinción Gram

Abstract: In the present work molecular symbiotic fixing bacteria associated with Medicago sativa nodules in the district of Socabaya, Arequipa, were isolated, identified and molecularly characterized. For which nodules were extracted from the root of Medicago sativa, from this sample was seeded in nutritious agar medium, incubated for 3 days. After the growth of colonies, strains of bacteria were selected, in which the isolation was made and 3 repeals by the striae method for a better purification of the strain.

The bacterial strain was called " socabaya01", which was given an antibiogram with 5 types of antibiotics (Erythromycin, Amikacin, Norfloxacin, Ceftriaxone and amikacin), as well as Gram stain tests. Finally all these strains were sent to sequence to the Uchumayo DNA Biotechnology Institute. Once the DNA sequence was obtained, the phylogenetic tree of the bacterial strain "socabaya01" was performed in the BLAST program, which presented a 99.79% similarity with Bacillus toyonensis. In addition to being the first record as an endophytic bacteria found in Medicago sativa nodules.

KEY WORDS: Nodules, Medicago sativa, " socabaya01", BLAST, Antibiogram, Gram stain